在构建克隆载体的过程中，科研人员常面临诸多挑战。例如，选择合适的限制性内切酶可能让人倍感头痛；酶切及克隆步骤繁琐且耗时；单克隆细菌的生长结果却常常没有条带，需要不断重复实验。回想起曾经的一位师兄，在进行载体构建时，每次都需要检测数十个单克隆以筛选阳性菌落，但常常一无所获。师兄便感慨，若能有一种方法确保每个生长的单克隆均为重组成功的样本，那该多好！

传统的酶切克隆和无缝克隆方法的核心在于连接酶的作用，这通过碱基互补的粘性末端使载体与DNA片段配对。然而，这些方法的假阳性率较高，因为连接酶不仅连接载体和片段，有时也会导致载体自连。为了应对这一挑战，尊龙凯时生物公司开发了一款基于重组酶原理的同源重组试剂盒，有效解决了载体构建中的假阳性问题，确保生长出的单克隆细菌均为阳性，甚至可以省略菌落验证，直接送测。

01 产品简介

尊龙凯时的CloneUFO® OneStepCloning技术是一种快速、高效、简便的DNA定向克隆技术，能够将目标基因的PCR产物定向克隆至任何载体的任意位置。该试剂盒基于T4噬菌体相关基因开发，核心采用重组酶UvsXase，配备重组反应所需的缓冲液。UvsXase与常规酶切和PCR反应体系兼容，允许克隆载体的酶切产物或PCR产物无需进行DNA纯化，直接用于重组克隆，大大简化了实验步骤。最终，通过将扩增的目的基因PCR产物和线性化载体按比例混合，在UvsXase的催化下，仅需30分钟反应便可完成定向克隆，阳性率可达95%以上。

02 产品特点

1. 位点无限制同源重组，设计重组位点不受限制性内切酶影响。

2. 重组效率高，反应时间仅需30分钟，条件温和。

3. UvsXase介导的高特异性重组，避免载体自连，阳性率大于95%。

03 实验案例

在实验中，将PCR产物进行胶回收，然后使用ATG#C101与其他品牌的同类产品同时对回收的片段与同一载体进行重组。通过转化大肠杆菌获得的单克隆细菌，进行菌落PCR验证，结果表明，使用ATG#C101重组后的阳性菌落数量适中，但其阳性率明显优于竞争对手。

04 产品信息

尊龙凯时的CloneUFO® OneStepCloning技术是解决克隆载体构建难题的理想选择，帮助科研人员提高效率，减少实验误差，为生物医疗研究的发展提供了强有力的支持。